陽離子色譜柱是一種常用的色譜柱,主要用于對帶正電荷的化合物進行分離和測定。它是指通過電荷相互作用和離子交換作用,在陽離子基質(zhì)如硅膠、聚合物等上進行分離。下面將詳細介紹陽離子色譜柱的作用、原理和選型標(biāo)準(zhǔn)。
一、作用
陽離子色譜柱主要用于分離和分析帶正電荷的化合物??梢苑蛛x出氨基酸、肽類物質(zhì)、藥物,以及離子交換的陽離子染料等。此外,陽離子柱還是裂解產(chǎn)物、離子半胱氨酸等樣品的分析測定的分離工具。
二、原理
陽離子色譜柱的分離原理主要基于荷電相互作用和離子交換作用。在正常相和酸性環(huán)境下,大多數(shù)化合物帶有正電荷。當(dāng)它們通過帶有陰離子交換基團的陽離子基質(zhì)時,它們將與交換基團發(fā)生親和作用并停留在柱上。
分離的原理可以歸納為兩個過程:
1.靜電分離:分離物質(zhì)在移動過程中相互間會與柱包涵的陰離子交換基團相互作用,即離子的靜電交換作用。
2.吸附分離:以交換基團為基礎(chǔ),在表面上引力吸附某些分離物質(zhì)與基質(zhì)之間的作用力。
三、選型標(biāo)準(zhǔn)
在選擇陽離子色譜柱時,需要考慮到不同樣品和實驗室需要的不同條件和目的,下面列舉了一些選型的標(biāo)準(zhǔn)和方面:
1.樣品類型:需要確定分離的目標(biāo)分子是否帶有正電荷,并且為了能保證分離的準(zhǔn)確性,需要樣品熔點和溶解性的一些基本參數(shù),這將有助于選擇適合的陽離子基質(zhì)。
2.樣品濃度:選型時需要根據(jù)樣品的濃度選擇不同的柱子,濃度越高則需要選擇更高的分離效率柱子。
3.基質(zhì)的密度、孔徑大小和硬度:選擇時需要考慮基質(zhì)的密度,孔徑大小和硬度是否均勻,這些都會直接影響到分離效果的好壞。
4.分離效率:具有高分離效率,可分離細碎的分子,對等環(huán)境的樣品具有較弱的對色譜柱的影響。
5.選擇適當(dāng)?shù)牧鲃铀俣龋涸谶x擇陽離子柱時還需要考慮樣品所要求的流量和移向速度等物理參數(shù),因為不適宜的流量和移向速度可能會嚴(yán)重影響分離率。